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真核表达系统

服务简介：

虽然原核表达有它的优势，但是近年来利用真核表达系统来表达目的蛋白越来越受到重视。目前，基因工程研究中常用的真核表达系统有酵母表达系统、昆虫细胞表达系统和哺乳动物细胞表达系统。真核表达它补充了一些原核蛋白表达系统中所缺乏的功能，例如真核表达时能够形成稳定的二硫键，在蛋白经过翻译后可对蛋白进行正确修饰，使表达出来的蛋白更具天然活性而不是被降解或者是形成包涵体；利用真核表达系统可以诱导高效表达，加快了人们对基因研究以及药物研究的进程。

将原核基因调控系统引入真核基因调控领域，其优点是：

①根据原核生物蛋白与靶DNA间作用的高度特异性设计，而靶DNA与真核基因调控序列基本无同源性，故不存在基因的非特异性激活或抑制；

②能诱导基因高效表达，可达105倍，为其他系统所不及；

③能严格调控基因表达，即不仅可控制基因表达的“开关”，还可人为地调控基因表达量。

真核表达系统分类、优缺点及应用：

表达系统	类别	优缺点	表达方式	优缺点	系统应用与比较
真核表达系统	哺乳动物细胞表达系统	能诱导高效表达，对表达的蛋白进行正确折叠，并进行复杂糖基化修饰，蛋白活性接近于天然蛋白，不需去除内毒素，周期较长，操作复杂，需要细胞房，无菌，成本投入高	瞬时转染	能够快速灵活的制备活性蛋白，周期为3-4天；外源基因不能整合到细胞上，不能稳定表达目的蛋白，不适合大批量表达蛋白。	细哺乳动系统是基因工程药物的生产平台，适用于新基因的发现，蛋白质结构和功能的研究。是真核表达系统中成本最昂贵的但是也是唯一可以表达复杂蛋白基因的系统。
			稳定细胞系构建	外源基因能在细胞内稳定表达，筛选出的稳定细胞株能够实现蛋白的大量生产筛选困难且时间长，投入大
	酵母表达系统	遗传背景清楚，操作较为简便，容易进行遗传操作，有较为完善的真核蛋白表达控制系统；	毕赤酵母表达	能大规模真核表达蛋白，可表达出克级蛋白；甲醇诱导操作方面需要时间；甲醇毒性大，不适用于生产食品蛋白.	在基因，遗传疾病研究中运用广泛，许多遗传性疾病的基因都和酵母基因有很高的同源性，研究酵母基因的编码以及其真核蛋白表达的蛋白可加深对这些疾病的了解，与哺乳动物系统相比只能表达简单修饰的蛋白。
			酿酒酵母表达	机理清楚，遗传操作简单；没有特异型病毒，成本低；可能会超糖基化；产生乙醇对细胞具有毒性。
	昆虫表达系统	细胞表达量高；表达的外源基因片段很大，最大可达到200KD；可实现蛋白的糖基化和磷酸化修饰；投入成本较高。			昆虫系统适用于表达高等真核生物蛋白可大规模悬浮培养，基础研究，医药卫生以及农业。成本较酵母系统较贵，但比哺乳系统便宜

服务流程：

方案沟通合同确认质粒构建蛋白表达蛋白纯化成果交付

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